聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)原理是什么

聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)原理是什么

聚丙烯酰胺凝膠電泳(polyacryamide gel electropHoresis, PAGE)是由丙烯酰胺單體和交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺在催化作用下形成的三維網(wǎng)狀結構物質(zhì)。在不連續聚丙烯酰胺凝膠電泳中，凝膠的制作是分層進(jìn)行的，因此凝膠不僅有分子篩效應，還具有濃縮效應。和瓊脂糖凝膠相比，聚丙烯酰胺凝膠難于制備和處理。它們的分離范圍較窄。但是它們也有突出的優(yōu)點(diǎn)，由于是不連續的pH 梯度，故樣品被壓縮成一條狹窄的區帶，因而增強了分離效果，提高電泳分辨率。尤其對小DNA 片段的分析(5～500bp)。在這一范圍內，僅差1bp 的DNA 分子也能清晰地分開(kāi)。其次，DNA 純度很高。從聚丙烯酰胺凝膠中得到的DNA 純度很高以致于下步操作不用任何處理。還有，它的負載容量高。該膠的標準加樣槽中可以加入高達10mL 的DNA 樣品，而不影響電泳分辨率。多應用于分離純化和鑒定大小為5～500bp 的DNA 片段。聚丙烯酰胺凝膠電泳有連續與不連續體系兩種，前者指在整個(gè)電泳體系中的緩沖液pH 值和凝膠孔徑大小相同，主要用于核酸分析。后者主要用于蛋白質(zhì)樣品的分離，它除了電泳槽中的緩沖體系和pH 值與凝膠中不同外，凝膠本身也由緩沖體系、pH 值和凝膠孔徑不同的兩種凝膠堆積而成。 
生物幫上面有這方面的詳細內容，分子生物學(xué)緩沖液

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